为什么电泳条带跑出来是横一条长直线

大家好，为什么电泳条带跑出来是横一条长直线相信很多的网友都不是很明白，包括为什么上样也是一样，不过没有关系，接下来就来为大家分享关于为什么电泳条带跑出来是横一条长直线和为什么上样的一些知识点，大家可以关注收藏，免得下次来找不到哦，下面我们开始吧！

本文目录

1. 向凝胶柱加入凝胶时为什么要平整
2. 为什么电泳上样时不能等太久
3. 为什么电泳条带跑出来是横一条长直线
4. 为什么必须保持胶面平整上样体积为什么不能太大

向凝胶柱加入凝胶时为什么要平整

第一个问题：胶面平整，可以保证你的样品中，不同组分分离时，各组分都在一个平面上，不同组分之间不会混到一起，如果胶面一边高一边低（假设有组分A），同一时间内，高低两边组分A位置不同，横向扩散的话，就和其它组分混一起了，达不到分离的目的。

第二个问题：如果上样体积过大，组分A浓度很大，那么在柱子里会占据很大体积，而柱子的体积是一定的，会和其它组分混了。

为什么电泳上样时不能等太久

电泳上样时不能等太久的原因分析如下：

一般情况下煮5分钟就可以了，建议不要超过10分钟。

时间太长蛋白煮化掉了，时间也不应少于3分钟，要不变性的不好，也跑不出好的条带。加热后离心的作用是去掉不溶的物质，正常情况下可以不离心，有些时间比如直接拿...时间太长蛋白煮化掉了，

为什么电泳条带跑出来是横一条长直线

解决方案如下:

1.检查用的胶的浓度和靶标蛋白的分子量是否适合

2.上样量过高，有的人怕蛋白太少，蛋白浓度又低，蛋白加的太多，一般上样量20-25ug即可

3.样品离子浓度高

4.拔完梳子后，加样孔有残留的胶，这样上样量就少了，因此建议，拔梳子后一定要用水把残留的胶冲净，但也要注意，水一定要吸干，否则和残留胶一样会导致同样的结果。

5.拔梳子时不要左右摇动，避免破坏加样孔底部。

6.上样要迅速，否则会引起样品扩散。

7.上样与跑电泳之间的间隔太长,尽量缩短时间间隔。

8.装配三明治结构要迅速。

9.电泳的电压太高，发热导致扩散。

10.降低一抗浓度。

11.可以适当缩短曝光时间。

12.10%APS现配现用,APS长期存放也会引起同样的问题。

为什么必须保持胶面平整上样体积为什么不能太大

第一个问题：胶面平整，可以保证你的样品中，不同组分分离时，各组分都在一个平面上，不同组分之间不会混到一起，如果胶面一边高一边低（假设有组分A），同一时间内，高低两边组分A位置不同，横向扩散的话，就和其它组分混一起了，达不到分离的目的。

第二个问题：如果上样体积过大，组分A浓度很大，那么在柱子里会占据很大体积，而柱子的体积是一定的，会和其它组分混了。

为什么电泳条带跑出来是横一条长直线的介绍就聊到这里吧，感谢你花时间阅读本站内容，更多关于为什么上样、为什么电泳条带跑出来是横一条长直线的信息别忘了在本站进行查找哦。